Введение. Тучные клетки (лаброциты, гепариноциты, тканевые базофилы, мастоциты) представляют особый интерес среди клеток соединительной ткани. Это целостная система функционально-лабильных клеток, располагающаяся во всех органах и тканях без исключения [1]. Они принимают участие в воспалительных процессах, инициируют и регулируют острые аллергические реакции, способствуют хронизацию воспалительного процесса и развитию фиброза, ангиогенезу, перестройке тканей и заживлению ран [2]. Многие свои функции они выполняют за счет полифункциональных медиаторов (цитокинов, хемокинов, монокинов, интерлейкинов, протеаз, протеогликанов, факторов роста и др.), располагаюшихся в их многочисленных цитоплазматических гранулах, и высвобождающихся при дегрануляции [3]. Лаброциты очень вариабельны по форме, размеру, зрелости, расположению в гистионе и функциям. В норме преобладают средние по размеру лаброциты, располагающиеся в основном периваскулярно. При этом, чем дальше клетка от сосуда, тем он больше. В рыхлой соединительной ткани они составляют до 10% от всех клеток [4].
Учитывая, что слизистая мезотимпанума представляет собой продолжение слизистой евстахиевой трубы, которая, в свою очередь, является продолжением слизистой носоглотки, известной своею аллергической «готовностью» [5], особый интерес вызывает участие тучных клеток в воспалительной реакции при хроническом среднем отите, а именно в развитии его осложнений местного характера.
Цель: изучить роль тучных клеток в патоморфогенезе местных осложнений хронического среднего отита.
Материалы и методы исследования. Исследование проведено в Международном учебно-научном центре Министерства Здравоохранения и медицинской промышленности Туркменистана на основе материала, присланного на патогистологическое исследование. Материал был поделен на 2 группы. I группу составили случаи с острым средним отитом (ОСО, n=32). Они были взяты для сравнения. II группа – случаи с хроническим средним отитом (ХСО, n=44). Пробоподготовка и окраска присланного на исследование материала осуществлялась по рекомендациям Коржевского [6]. После постановки патогистологического заключения готовились дополнительные парафиновые срезы. Они окрашивались спиртовым раствором толуидинового синего, приготовленного на основе буферного раствора при рH=6,0 по стандартной методике. Морфометрическим методом с использованием сетки Автандилова [7] и Image-Pro® Plus системы с программой IPWIN32.exe подсчитывалось количество тучных клеток в стромальном компоненте присланного на патогистологическое исследование материала (грануляционная ткань, полипы и так далее), изучались их форма, размеры, зрелость, расположение (по отношению к сосудам), наличие гранул («зернистости») и отростков, размеры ядер, количественное соотношение с другими клетками. Определялось также количество сосудов мелкого, среднего и крупного калибров. Статистическая обработка проводилась с помощью t-теста Стьюдента стандартного пакета программ Excel 2016.
Результаты исследования и их обсуждение. При конвенциональном морфологическом исследовании на основании окраски гематоксилином и эозином в обеих группах были отмечены воспалительные инфильтраты, имевшие черты аллергического компонента (эозинофилы, в том числе в состоянии краевого стояния у стенки сосудов, отек тканей, лимфоцитарная инфильтрация).
Полученные результаты гистоцитоморфометрического исследования показали ключевую роль лаброцитов в патоморфогенезе местных осложнений хронического среднего отита. Его результаты представлены в таблице.
Таблица. Сравнительная характеристика параметров лаброцитов между группами
с острым и хроническим средним отитом
Table. Comparative characteristics of mast cell parameters between groups
with acute and chronic otitis media
|
Параметр |
I группа - ОСО, n=32 (M±m) |
II группа - ХСО, n=44 (M±m) |
p-показатель |
|
Исследованная площадь препарата, мкм2 |
4503483,6± 524002,5 |
4820194,7± 6002274,2 |
n.s. |
|
Крупные лаброциты, в 1 мм2 |
4,37±0,63 |
8,82±1,24 |
р<0,05 |
|
Функционально активные лаброциты (отростчатые, с метахроматическими гранулами), в 1 мм2 |
3,28±0,48 |
8,25±1,11 |
р<0,01 |
|
Средние и малые лаброциты, в 1 мм2 |
17,27±3,73 |
18,74±4,08 |
n.s. |
|
Периваскулярно расположенные лаброциты, в 1 мм2 |
10,02±2,53 |
10,86±3,14 |
n.s. |
|
Диффузно (свободно) расположенные лаброциты, в 1 мм2 |
13,55±3,62 |
24,16±5,44 |
р<0,05 |
|
Лаброциты с признаками дегрануляции, в 1 мм2 |
2,75±0,67 |
7,38±2,05 |
р<0,01 |
|
Количество лаброцитов по отношению к другим клеткам соединительной ткани, % |
1,68±0,28 |
5,39±0,69 |
р<0,01 |
|
Крупные и средние по калибру сосуды, в 1 мм2 |
5,07±0,84 |
5,78±0,97 |
|
|
Мелкие по калибру сосуды, в том числе капиллярного типа, в 1 мм2 |
11,7±2,59 |
20,63±4,74 |
р<0,05 |
Примечание: n.s. – статистически не достоверно (no significant)
Note: n.s. – statistically not significant (no significant)
Как видно из вышеуказанной таблицы, данные гистоцитоморфометрического исследования показали статистически достоверное преобладание во II группе у больных с ХСО по сравнению с I крупных лаброцитов с диаметром более 14 мкм (р<0,05), их отростчатых форм (р<0,01), форм с обильной метахроматичной (р<0,01) зернистостью, а также лаброцитов с признаками дегрануляции (рис. 1 и 2) и расположенных преимущественно диффузно, то есть не только периваскулярно (р<0,05). Общее количественное соотношение лаброцитов по отношению к другим клеткам соединительной ткани также было достоверно выше во II группе по сравнению с I (р<0,01). По количеству мелких лаброцитов с ортохроматичной зернистостью, размеру ядер, ядерно-цитоплазматическому соотношению в них показатели групп между собой не отличались.
|
|
|
|
Рис. 1. Группа I. Крупные тучные клетки с минимальными признаками дегрануляции. Воспалительный инфильтрат, окраска толуидиновым синим, ×1250 Fig. 1. Group I. Large mast cells with minimal signs of degranulation. Inflammatory infiltrate, stained with toluidine blue, ×1250 |
Рис. 2. Группа II. Крупные тучные клетки с явными признаками дегрануляции (особенно клетка в центре снимка). Воспалительный инфильтрат, окраска толуидиновым синим, ×1250 Fig. 1. Group II. Large mast cells with obvious signs of degranulation (especially the cell in the center of the picture). Inflammatory infiltrate, stained with toluidine blue, ×1250 |
Количество средних по размеру лаброцитов было немного выше в I группе по сравнению со II, но статистически достоверно этот показатель также не преобладал. Количество сосудов среднего и крупного калибров между группами статистически достоверно не отличалось. В то время как количество сосудов мелкого калибра, в том числе капиллярного типа, было достоверно выше во II группе (р<0,05).
Вышеприведенные данные показывают, что при ХСО тучные клетки оказывают более существенное влияние на морфогенетический характер воспаления. На наш взгляд это приводит, в свою очередь, к частому развитию осложнений в виде полипов и грануляций, характеризующихся прежде всего выраженным ангиогенезом мелких сосудов. Традиционно тучные клетки общепризнанны как ключевые клетки аллергической реакции І типа и воспаления [8]. Ими синтезируются биологически активные вещества, которые влияют на проницаемость сосудов, обеспечивают приток и стимулируют активность клеток микроокружения, участвуют в воспалительных процессах, активируют фибробласты, инициируют и регулируют острые аллергические реакции, а также способствуют хронизации воспалительного процесса и развитию фиброза [9]. В этой связи особую ценность имеют результаты по лаброцитам, расположенным преимущественно диффузно (то есть не только периваскулярно), особенно крупным (d>14 мкм), а также лаброцитам с признаками дегрануляции.
Процесс дегрануляции при этом вызывает особый интерес. Тучным клеткам обычно приписывают две основные группы функций: 1) участие в образовании межклеточного вещества путем синтеза сульфатированных гликозамингликанов (эта пластическая функция клеток обеспечивает нормальную структуру соединительной ткани); 2) синтез, накопление и экзоцитоз биологически активных веществ, влияющих на микроокружение, то есть регуляция местного гомеостаза, прежде всего путем участия в контроле за микроциркуляторным руслом, тонусом артериол и проницаемостью капилляров [10]. Как видно, вторая группа функций напрямую связана с воспалительным процессом. Столь разнообразные функции ТК осуществляются в результате постоянных циклических изменений в клетке, то есть чередования процессов образования и созревания гранул, их секреции и последующей ре-грануляции, что позволяет некоторым авторам рассматривать ТК как «одноклеточные железы» [11] и как активный компонент поддержания иммунологического гомеостаза в тканях организма [12].
Выводы. Таким образом, при хроническом среднем отите тучные клетки оказывают более существенное влияние на морфогенетический характер воспаления по сравнению с острым. Это обуславливает частое развитие осложнений в виде полипов и грануляций, характеризующихся прежде всего выраженным ангиогенезом мелких сосудов. Вышесказанное позволяет по-новому взглянуть на существующие методики лечения больных с местными осложнениями при хроническом среднем отите. В этой связи устранение аллергического компонента в патоморфогенезе воспаления могло бы сыграть решающую роль в достижении эффективности лечения. Особо интересным в этом плане выглядит местное применение десенсибилизирующих лекарственных средств в сочетании с препаратами растительного происхождения при лечении данной патологии с целью снижения уровня сенсибилизации тканей.
