Blagoveschensk, Blagoveshchensk, Russian Federation
Blagoveschensk, Blagoveshchensk, Russian Federation
Blagoveschensk, Blagoveshchensk, Russian Federation
UDK 61 Медицина. Охрана здоровья
GRNTI 76.03 Медико-биологические дисциплины
GRNTI 76.29 Клиническая медицина
OKSO 31.08.01 Акушерство и гинекология
BBK 54 Клиническая медицина
TBK 57 Медицина. Фармакология
BISAC MED068000 Pathophysiology
A method for assessing the impairment of embryo implantation during pregnancy complicated by cytomegalovirus infection, based on the detection of cyclooxygenase 2 in the villous chorionic homogenate, is proposed
pregnancy, cytomegalovirus infection, cyclooxygenase 2, chorionic villi
Нарушение процесса имплантации является одним из основных факторов развития ранних репродуктивных потерь. Вопросам этиологии, патогенеза, терапии и профилактики невынашивания беременности посвящено большое количество работ, тем не менее, продолжается изучение патогенетических механизмов этой патологии с целью разработки наиболее эффективных мер профилактики ранних репродуктивных потерь [1, 7, 8]. По данным многих авторов, частота невынашивания беременности, не имеет тенденцию к снижению и составляет 10-25% от всех беременностей [9].
Показано, что в современных условиях одним из ведущих факторов нарушения имплантации эмбриона во время беременности является урогенитальная инфекция, в развитии которой особая роль отводится хламидиям, микоплазмам, уреаплазмам, цитомегаловирусу (ЦМВ) и вирусу простого герпеса [2]. Инфекция может оказывать прямое цитотоксическое действие на эмбрион за счет активации цитокинов и свободных радикалов на фоне повышенной продукции токсических веществ, вырабатываемых при разрушении микроорганизмов, и приводить к гибели эмбриона на любых стадиях гестации [10]. Нарушение развития эмбриона может вести к прерыванию беременности не только за счет прямого специфического воздействия инфекционных агентов, но и быть обусловленным персистенцией микроорганизмов и вирусов в эндометрии и плаценте.
Неблагоприятное влияние цитомегаловирусной инфекции на плаценту реализуется за счет активации медиаторов воспаления, что ведет к гибели клеток трофобласта, развитию плацентарной недостаточности и, как следствие, угрозы невынашивания беременности [4, 13].
При наличии ЦМВ инфекции возможно развитие бессимптомной инфекции без последствий для беременности. Однако в некоторых случаях наличие ЦМВ инфекции повышает риск нарушения эмбриогенеза, внутриутробного поражения плода, спонтанного аборта и плацентарной недостаточности [3, 5, 12].
Вышеизложенные данные о частоте невынашивания беременности и значении инфекционного фактора определяют необходимость разработки способов оценки нарушения имплантации эмбриона с целью определения факторов риска угрожающего течения беременности и ее прерывания на ранних сроках. Как показывают исследования, персистенция ЦМВ инфекции в период беременности обусловливает мощную и длительную активацию процессов перекисного окисления липидов с угнетением антирадикальной защиты. Персистирующие антигены ЦМВ, медиаторы воспаления (TNFα, IL-1, INFγ), метаболиты перекисного окисления липидов (ПОЛ) усиливают активность фермента фосфолипазы А2 и, тем самым, интенсифицируют каскад преобразований арахидоновой кислоты, с образованием метаболически активных простагландинов E и F, которые играют важную роль в развитии беременности, являясь активаторами родов. Равномерное соотношение концентраций этих двух простагландинов сдерживают сокращение матки, предотвращая выкидыши на ранних сроках гестации [6, 11, 16].
Биологические эффекты простагландинов регулируются циклоксигеназой 2 (COX-2) – ферментом, обеспечивающим синтез простаноидов, а также соответствующими рецепторами, с которыми простаноиды взаимодействуют. Фермент COX-2 синтезируется в различных тканях, в том числе и в плаценте. Результаты исследований показали, что увеличение экспрессии COX-2 в плаценте играет важную роль в развитии плацентарных нарушений, при патологическом течении беременности [15, 18, 19], путем уменьшения плацентарного кровотока [12].
В литературе имеются данные, указывающие на потенциальные связи окислительного стресса и индукции COX-2 в плаценте, что приводит к избыточному синтезу простагландинов [13, 17]. Индукция COX-2 связана с окислительным стрессом за счет активации p38MAPK и NF-kB семейства транскрипционных факторов [14]. Простагландин, синтезируемый в плаценте в ответ на окислительный стресс, высвобождается в кровоток матери и индуцирует процесс родов, путем увеличения сократительной способности матки [10]. Следовательно, COX-2, через синтез простагландинов, влияет на регуляцию важнейших физиологических процессов во время беременности. Вместе с тем, анализ современной литературы показал, что данных о влиянии ЦМВ инфекции на индукцию липолитического фермента COX-2, приводящей к повышению продукции простагландинов и нарушению имплантации эмбриона нет.
Задачей исследования явилась разработка способа оценки нарушения имплантации эмбриона при беременности, осложненной ЦМВ инфекцией путем определения циклооксигеназы-2 в гомогенате ворсинчатого хориона
Способ осуществляют следующим образом:
У беременных женщин с выявленной ЦМВ инфекцией и состоявшимся выкидышем на первом триместре беременности исследуют ворсинчатый хорион, полученный после выскабливания стенок полости матки. Определение уровня COX-2 проводят методом иммуноферментного анализа с использованием тест-систем «Assay Desings, COX-2» (США). Учет реакции проводят на иммуноферментном анализаторе Stat Fax-2100 (США) согласно протоколам для постановки иммуноферментного анализа фирмы-производителя в гомогенате ворсинчатого хориона.
Статистическую обработку данных проводили с помощью программы IBM SPSS Statistic 20 (Statistical Package for Social Sciences, США). Полученные данные оценивали методами статистического описания и проверки статистических гипотез. Анализировали выборку с помощью гипотезы нормальности распределения (Колмогорова-Смирнова). В качестве средневыборочной характеристики использовали средние величины (M) и стандартную ошибку (m). Для оценки статистической достоверности исследуемых выборок использовали непараметрический критерий Вилкоксона для зависимых выборок, не подчиняющихся нормальному закону распределения. Различия считались значимыми при уровне р < 0,05.
При значении COX-2 в гомогенате ворсинчатого хориона 16,85 нг/мл и более делают заключение о нарушении имплантации эмбриона при беременности, осложненной ЦМВ инфекцией на первом триместре.
Правильность выводов была подтверждена результатами исследования. В гомогенате ворсинчатого хориона беременных с ЦМВ инфекцией средние показатели COX-2 составили 16,85±0,53 нг/мл (p<0,05). У ЦМВ-серонегативных женщин средние показатели COX-2 в гомогенате ворсинчатого хорион составили 10,85±0,42 нг/мл.
Таким образом, представленные результаты показывают, что при значении COX-2 в гомогенате ворсинчатого хориона 16,85 нг/мл и более с вероятностью 95% делают заключение о нарушении имплантации эмбриона при беременности, осложненной ЦМВ инфекцией, что подтверждает диагностическую значимость определения данного показателя для прогнозирования осложнений гестационного периода.
1. Andrievskaya I.A., Ishutina N.A. Sposob ocenki narusheniya implantacii embriona pri beremennosti, oslozhnennoy citomegalovirusnoy infekciey, putem opredeleniya ciklooksigenazy-2 v gomogenate vorsinchatogo horiona: patent RF №2685554 ot 07.05.2019.
2. Borovkova L.V., Kolobova S.O. Sovremennyy vzglyad na problemu nevynashivaniya beremennosti infekcionnogo geneza // Konsilium. 2016. № 3(146). S. 19-24.
3. Dolgushina N.V., Makacariya A.D. Virusnye infekcii u beremennyh. M.: Triada-H, 2009. 35 s.
4. Ishutina N.A., Dorofienko N.N., Andrievskaya I.A. Malonovyy dial'degid i faktor nekroza opuholey α v perifericheskoy krovi beremennyh s citomegalovirusnoy infekciey // Byulleten' fiziologii i patologii dyhaniya. 2015. Vyp. 55. S. 78-81.
5. Korotkova N.A., Prilepskaya V.N. Citomegalovirusnaya infekciya i beremennost' (predgravidarnaya podgotovka i terapiya) // Effektivnaya farmakoterapiya. 2016. № 22. S. 28-32.
6. Lucenko M.T., Andrievskaya I.A., Ishutina N.A. Sposob ocenki strukturno-funkcional'nogo sostoyaniya membran eritrocitov perifericheskoy krovi u beremennyh pri obostrenii gerpes-virusnoy infekcii: patent RF №2389021 S ot 10.05.2010.
7. Serov V.N., Sidel'nikova V.M., Agadzhanova A.A., Tetruashvili N.K. Placentarnaya nedostatochnost' v klinike nevynashivaniya beremennosti // Russkiy medicinskiy zhurnal. 2003, T.11, №6, S. 88-93.
8. Sidel'nikova V.M. Aktual'nye problemy nevynashivaniya beremennosti. M., 1999. 138 s.
9. Tetruashvili N.K. Privychnoe nevynashivanie // Klinicheskie rekomendacii. M., 2008.
10. Tihomirov A.L., Lubnin D.M. Privychnoe nevynashivanie beremennosti: prichiny, diagnostika i sovremennye podhody k terapii // Farmakinetika. 2004. № 1. S. 28-39.
11. Funkciya prostaglandinov v organizme cheloveka / URL: https://gormonys.ru/other/prostaglandiny.html /data obrascheniya: 19.06.2020.
12. Bennett P.R., Henderson D.J., Moore G.E. Changes in expression of the cyclooxygenase gene in human fetal membranes and placenta with labor // Am. J. obstet.Gynecol. 1992; 167(1): 212-6.
13. Burdon C., Mann C., Cindrova-Davies T., Ferguson-Smith A.C., Burton G.J. Oxidative stress and the induction of cyclooxygenase enzymes and apoptosis in the murine placenta // Placenta. 2007. V. 28(7). P. 724-733.
14. Chou D., Ma Y., Zhang J. Cytomegalovirus infection of trophoblast cell elicits an inflammatory response: a possible mechanism of placental dusfunction // Am. J. Obstet. Gynecol. 2006. V. 194(2). P. 534-541.
15. Goksu Erol A.Y., Nazli M., Yildiz S.E. Expression levels of cyclooxygenase-2, tumor necrosis factor-α and inducible NO synthase in placental tissue of normal and preeclamptic pregnancies // J. Matern Fetal Neonatal Med. 2012. V. 25(6). P. 826-830.
16. Malek A., Sager R., Schneider H. Effect of hypoxia, oxidative stress and lipopolysaccharides on the release of prostaglandins and cytokines from human term placental explants // Placenta. 2001. V. 22 (Suppl. A). S45–S50.
17. Newton R., Kuitert L.M., Bergmann M., Adcock I.M., Barnes P.J. Evidence for involvement of NF-kappaB in the transcriptional control of COX-2 gene expression by IL-1beta // Biochem Biophys Res Commun. 1997. V. 237. P. 28–32.
18. Okawara M., Seki H., Matsuoka K., Hashimoto F., Hayashi H., Takeda S. Examination of the expression of cyclooxygenase-2 in placenta villi from sufferers of pregnancy induced hypertension // Biol. Pharm. Bull. 2009. V. 32(12). P. 2053-2056.
19. Xu Y., Khipp G.T., Cook T.J. Expression of cyclooxygenase isoforms in developing rat placenta, human term placenta, and BeWo human trophoblast model // Mol. Pharm. 2005. V. 2(6). P. 481-490.
