Цель исследования – изучение остаточной вирулентности, антигенных свойств, длительности приживаемости и контагиозности штамма B. abortus 82-Tr. Определение остаточной вирулентности проводили на 45 морских свинках, разделенных на 9 групп по 5 голов в каждой. Животных первой группы иммунизировали культурой из штамма 82-Tr подкожно в области паха в объеме 1 мл с содержанием 10 м.к.; второй – 50; третьей – 100; четвертой – 500; пятой – 1000; шестой – 10 тыс.; седьмой – 100 тыс.; восьмой – 1 млн; девятой – 9 млрд м.к. Для изучения длительности приживаемости штамма B. abortus 82-Tr в организме морских свинок, его безвредности и контагиозности использовали 21 животное, первую половину которых прививали культурой из штамма 82-Tr в дозе 1,5 млрд м.к., а вторую половину (непривитых) подсаживали к ним. В течение 4 месяцев после введения культуры раз в месяц у 3 морских свинок из каждой группы животных брали кровь из сердца для серологических исследований, а затем подвергали их эвтаназии с последующим бактериологическим исследованием. Было установлено, что культура штамма начинает приживаться в концентрации 1000 м.к. С увеличением концентрации вводимой культуры происходило незначительное снижение индекса инфицированности (ИИ) до (42,0±5,8) при 1 млн м.к. и (40,0±15,3) при дозе 1 млрд м.к. Исследования дают основание считать, что культура штамма 82-Tr обладает слабовыраженной остаточной вирулентностью.
бруцеллез, инфекция, контагиозность, B. abortus, вирулентность, приживаемость, тетрациклинрезистентный вариант
Введение. Бруцеллез (Brucellosis) – зоонозная, преимущественно хроническая инфекционная болезнь различных видов домашних сельскохозяйственных, а также диких животных и человека, которая является одной из наиболее значимых и злободневных проблем ветеринарии и медицины [1]. Несмотря на улучшение эпизоотической ситуации по бруцеллезу животных в Российской Федерации, проблема оздоровления скота еще не решена [2]. Особенностью течения бруцеллезной инфекции является ее контагиозность. Болезнь особенно негативно проявляется у животных в молодом возрасте, вызывает гибель, слабое и позднее развитие, а, следовательно, недополучение продукции от них в зрелом возрасте [3, 4]. В системе противоэпизоотических мероприятий при бруцеллезе животных решающую роль всегда играла специфическая профилактика [5]. В связи с этим дальнейшее и детальное изучение инфекционного процесса бруцеллеза – главная задача ветеринарной и медицинской микробиологии.
Цель исследования – изучение остаточной вирулентности, антигенных свойств, длительности приживаемости и контагиозности штамма B.abortus 82-Tr (тетрациклинрезистентного варианта штамма B.abortus 82).
Материалы и методы. Определение остаточной вирулентности проводили на 45 морских свинках, разделенных на 9 групп. Животных первой группы иммунизировали вакциной из штамма 82-Tr подкожно в области паха в объеме 1 см3 с содержанием 10 м.к.; второй – 50; третьей – 100; четвертой – 500; пятой – 1 тыс.; шестой – 10 тыс.; седьмой – 100 тыс.; восьмой – 1 млн, девятой – 9 млрд м.к. Взвесь бруцелл разводили на фосфатно-забуферном растворе хлористого натрия (pH 8,0).
Бактериологический контроль вводимой дозы проводили путем высева взвеси бруцелл в объеме 0,1 мл на чашки Петри с триптозным агаром и последующим подсчетом выросших колоний. Через один месяц после иммунизации морских свинок подвергали эвтаназии с последующим проведением бактериологического и серологического исследований.
Для изучения длительности приживаемости культуры в организме морских свинок, ее безвредности и контагиозности использовали 21 животное, 10 из которых прививали культурой из штамма 82-Tr в дозе 1,5 млрд м.к., а 11 (непривитых) подсаживали к ним. В течение 4 месяцев после вакцинации раз в месяц у 3 морских свинок из каждой группы брали кровь из сердца для серологических исследований, а затем их подвергали эвтаназии с последующим бактериологическим исследованием.
Результаты и их обсуждение. При определении остаточной вирулентности и антигенных свойств штамма 82-Tr установили, что культура приживается в организме в дозе 10 м.к. От одной морской свинки выделили одну культуру бруцелл. Результаты исследований представлены в таблице 1. Серологические реакции этого животного были отрицательными, а также наблюдался самый низкий ИВС (индекс веса селезенки), равный (1,3±0,15). Результаты серологического и бактериологического исследований в группах животных, которым вводили 50, 100 и 500 м.к., были отрицательными. При бактериологическом исследовании установили, что начиная с концентрации 1 тыс. м.к. от одной морской свинки из этой группы были получены 2 культуры, от другой – 1, от третьей – посевы были стерильными.
Результаты исследования интактных морских свинок, подсаженных в клетку к вакцинированным животным, во все сроки были отрицательными.
Таблица 1
Остаточная вирулентность и антигенные свойства штамма B. abortus 82-Tr
|
Доза культуры, м.к. |
Кол-во животных |
РБП |
РА |
РСК |
Кол-во выделенных культур |
ИИ, % |
ИВС |
|
|
S-аг. |
R-аг. |
|||||||
|
10 |
5 |
Отриц. |
Отриц. |
Отриц. |
Отриц. |
1 |
2,0±2,0 |
1,33±0,15 |
|
50 |
5 |
Отриц. |
Отриц. |
Отриц. |
Отриц. |
0 |
0 |
1,72±0,20 |
|
100 |
5 |
Отриц. |
Отриц. |
Отриц. |
Отриц. |
0 |
0 |
1,86±0,13 |
|
500 |
5 |
Отриц. |
Отриц. |
Отриц. |
Отриц. |
0 |
0 |
1,73±0,05 |
|
1000 |
5 |
Отриц. |
Отриц. |
Отриц. |
1–1:10 4 – отриц. |
3 |
6,0±4,0 |
1,37±0,04 |
|
10 тыс. |
5 |
Отриц. |
Отриц. |
Отриц. |
10,0±0,0 |
18 |
36,0±2,5 |
1,74±0,23 |
|
100 тыс. |
5 |
Отриц. |
Отриц. |
Отриц. |
9,0±1,0 |
22 |
44,0±9,2 |
1,97±0,16 |
|
1 млн |
5 |
Отриц. |
Отриц. |
Отриц. |
16,0±2,5 |
21 |
42,0±5,8 |
2,07±0,10 |
|
1 млрд |
3 |
Отриц. |
Отриц. |
Отриц. |
40,0±20,0 |
12 |
40,0±20,0 |
2,73±0,87 |
Здесь и далее: отриц. – отрицательно.
Таблица 2
Длительность приживаемости и контагиозность штамма B.abortus 82-Tr на морских свинках
|
Срок исследования после вакцинации, мес. |
Группа животных |
Кол-во животных, голов |
РБП |
РА |
РСК |
Кол-во выделенных культур |
ИИ, % |
ИВС |
|
|
S-аг. |
R-аг. |
||||||||
|
1 |
Привитые |
3 |
Отриц. |
Отриц. |
Отриц. |
40,0±20,0 |
12 |
40,0±15,3 |
2,73±0,87 |
|
Подсаженные |
2 |
Отриц. |
Отриц. |
Отриц. |
Отриц. |
0 |
0 |
2,78±0,17 |
|
|
2 |
Привитые |
3 |
Отриц. |
Отриц. |
Отриц. |
46,7±17,7 |
5 |
16,7±3,3 |
1,40±0,10 |
|
Подсаженные |
2 |
Отриц. |
Отриц. |
Отриц. |
Отриц. |
0 |
0 |
1,775 |
|
|
3 |
Привитые |
3 |
Отриц. |
Отриц. |
Отриц. |
23,3±8,8 |
7 |
23,3± 8,8 |
1,90±0,10 |
|
Подсаженные |
2 |
Отриц. |
Отриц. |
Отриц. |
Отриц. |
0 |
0 |
0,09±0,14 |
|
|
4 |
Привитые |
3 |
Отриц. |
Отриц. |
Отриц. |
Отриц. |
1 |
3,3±3,3 |
1,99±0,21 |
|
|
Подсаженные |
2 |
Отриц. |
Отриц. |
Отриц. |
Отриц. |
0 |
0 |
1,85±0,15 |
Из таблицы 2 видно, что длительность приживаемости культуры штамма 82-Tr в организме животных составляет 4 месяца. Через один месяц ИИ составлял (40,0±5,3), через два месяца (46,7±17,7), через 3 месяца (23,3±8,8), а через 4 месяца был отрицательным. При этом от 3 морских свинок выделили всего одну культуру бруцелл.
Заключение. Таким образом, культура штамма 82-Tr обладает слабовыраженной остаточной вирулентностью, так как генерация вакцинного процесса наступает лишь от дозы 10 тыс. м.к. Приживаемость штамма составляет 4 месяца, контагиозностью не обладает. Культура штамма 82-Tr (тетрациклинрезистентный вариант штамма B. abortus 82) является слабовирулентным с минимальной инфицирующей дозой 1 тыс. м.к.
1. Бруцеллез сельскохозяйственных животных на территории Иркутской области / А.М. Аблов [и др.] // Вестник АПК Ставрополья. 2015. № 4 (20). С. 81–84.
2. Система контроля эпизоотологического процесса бруцеллеза мелкого рогатого скота / П.К. Аракелян [и др.] // Ветеринария. 2008. № 2. С. 20–22.
3. Гарсия Каррильо С. Бруцеллез животных и человека в Северной и Южной Америке. Париж, 1990. С. 287.
4. Бруцеллез / П.Н. Жованик [и др.]. Киев: Урожай, 1975. С. 9.
5. Триленко П.А. Бруцеллез сельскохозяйственных животных. Ленинград: Колос, 1976. С. 3–5.
6. Фомин А.М., Сафина Г.М., Скляров О.Д. Этапы оздоровления Самарской области от бруцеллеза крупного рогатого скота // Мат-лы межунар. науч. конф., посвящ. 80-летию Самарской НИВС. Самара, 2009. С. 516–520.
7. Маркерные локусы генома бруцелл для дифференциальной ПЦР индикации патогенных штаммов / Н.И. Хаммадов [и др.] // Проблемы особо опасных инфекций. 2018. № 3. С. 88–93.
