from 01.01.2010 until now Blagoveschensk, Blagoveshchensk, Russian Federation
Blagoveschensk, Blagoveshchensk, Russian Federation
VAC 14.01.2025 Пульмонология
UDK 61 Медицина. Охрана здоровья
GRNTI 76.29 Клиническая медицина
OKSO 31.06.2001 Клиническая медицина
BBK 53 Клиническая медицина в целом
BBK 541 Внутренние болезни
BBK 571 Гинекология
TBK 5743 Пульмонология
BISAC MED079000 Pulmonary & Thoracic Medicine
V rabote izuchalis' uroven' oksida azota v vydyhaemom vozduhe (NOex) i geny endotelial'noy sintazy oksida azota u beremennyh s bronhial'noy astmoy. Dlya vyyavleniya osobennostey NOex byli obsledovany beremennye s allergicheskoy BA v dinamike. Vyyavleno dostovernoe uvelichenie NOex na protyazhenii vsego perioda gestacii. Pri etom samyy vysokiy uroven' otmechen u beremennyh s BATT v III trimestre, chto svyazano s bol'shim kolichestvom obostreniy v etom periode. Tak zhe vyyavleno, chto u bol'nyh s kontroliruemym techeniem BA uroven' NOex priblizhaetsya k normal'nym cifram, a pri nekontroliruemom techenii maksimal'nye znacheniya registriruyutsya vo II trimestre, chto trebuet korrektirovki lecheniya dlya preduprezhdeniya razvitiya obostreniy. Pri dal'neyshem issledovanii genov, uchastvuyuschih v formirovanii endotelial'noy disfunkcii, vyyavleno, chto patologicheskie alleli gena eNOS 894 i 786 chasche vstrechalis' pri BA. Nalichie polimorfnyh genov G894T i T786S dostoverno mozhno schitat' markerom razvitiya BA, prichem imeyuschayasya patologicheskaya gomozigota v polozhenii 894 obuslovlivaet razvitie tyazheloy BA. Nalichie patologicheskoy gomozigoty 894TT dostoverno vliyaet na vyrabotku NO, kotoryy uvelichivaet uroven' NOex vo vseh treh trimestrah beremennosti, v otlichie ot genotipa 894GT, chto tak zhe vliyaet na tyazhest' techeniya BA, uroven' kontrolya i ob'em neobhodimoy bazisnoy terapii. Pri nalichii polimorfizma genov eNOS 894GT i 894TT chasche otmechaetsya uhudshenie techeniya BA v period gestacii, v otlichie ot beremennyh s BA s normal'nym genotipom. Genotip 894GG dostoverno uluchshaet dinamiku techeniya BA v periode gestacii.
bronhial'naya astma, oksid azota v vydyhaemom vozduhe, gen endotelial'noy sintazy oksida azota, beremennost', endotelial'naya disfunkciya
УДК 616.248-084:618.2-06
Т.А. Лучникова, канд. мед. наук, О.Б. Приходько, д-р мед. наук
ФГБОУ ВО Амурская ГМА Минздрава РФ, г. Благовещенск
ОКСИД АЗОТА В ВЫДЫХАЕМОМ ВОЗДУХЕ И ГЕНЫ ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ СИНТАЗЫ ОКСИДА АЗОТА У БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ В ПЕРИОД ГЕСТАЦИИ
Введение. В Амурской области заболеваемость БА во время беременности составляет 4,8 на 1000 человек [1,2]. При этом в последние годы увеличился процент манифестации БА во время беременности на 2% за счет изменившихся условий окружающей среды, в частности крупномасштабного наводнения в 2013г [1,2,4]. К настоящему времени можно считать доказанным тот факт, что бронхиальная астма не служит противопоказанием к беременности, но своевременная диагностика, индивидуализированный подход к терапии являются необходимым условием благополучного вынашивания ребенка матерью, страдающей этим заболеванием [3,4,8,9,10].
За последние десятки лет проведено множество исследований, касающихся влияния определенных генов на течение БА, в том числе и генов эндотелиальной синтазы (eNOS). В частности, широко обсуждается роль полиморфизма 4а/4b в 4 интроне в утяжелении течения бронхиальной астмы [5,6]. Так же хорошо изучена роль полиморфизма eNOS 894 G>T и 786 T>C при развитии сердечно-сосудистых заболеваний и влияние на сосудистый эндотелий [6,7]. Однако работ по изучению влияния eNOS на уровень оксида азота у больных БА недостаточно.
Цель исследования – определить влияние эндотелиальной синтазы оксида азота на уровень оксида азота в выдыхаемом воздухе при различном течении БА в период гестации.
Материалы и методы: Материалом для молекулярно-генетического исследования послужили образцы ДНК 52 беременных с БА и 30 беременных без бронхолегочной патологии (группа сравнения). В данном исследовании проводилось измерение уровня оксида азота в выдыхаемом воздухе у 52 беременных на всем периоде гестации (NOex) на аппарате NO Breath (Великобритания) в режиме on-line в каждом триместре беременности и при каждом обострении БА.
Анализ генетических полиморфизмов осуществляли коммерческими наборами реагентов методом аллель-специфичной полимеразной цепной реакции (ПЦР) в «режиме реального времени» со снятием кривых плавления продуктов амплификации. Анализ результатов ПЦР проводили в автоматическом режиме программного обеспечения, детектирующего амплификатора Дтпрайм (ООО «ДНК-Технология», Россия). Исследовали следующие полиморфные варианты генов эндотелиальной синтазы оксида азота (eNOS) 786 T>C, 894G>T. Наблюдаемое распределение полиморфных генов метаболизма фолатов, соответствовало равновесию Харди-Вайнберга во всех группах беременных, как с БА, так и в группе сравнения. Полученные результаты обрабатывались в программе STATISTICA 6.1, методами непараметрической статистики с применением двустороннего точного критерия Фишера, статистически достоверными считались различия при р <0,05.
Результаты исследования и их обсуждение. В ходе исследования было установлено, что уровень NOex у беременных с БА с различными степенями тяжести и уровнями контроля, в среднем, составил в I триместре – 36,83±13,22 ррb, во II триместре – 35,14±12,94ppb, в III триместре – 32,45±12,31ppb. Из приведенных данных следует, что уровень оксида азота в выдыхаемом воздухе на всем протяжении гестации был достоверно выше границ нормы у взрослых (NOex=25 ppb). существует прямая зависимость между степенью тяжести заболевания и уровнем оксида азота в выдыхаемом воздухе. Так, отмечена тенденция к повышению уровня NOex в зависимости от триместра беременности и степени тяжести. При бронхиальной астме легкой степени и средней степени наибольший уровень оксида азота в выдыхаемом воздухе определялся в I триместре. Это связанно с изменением гормонального фона женщины, увеличением уровня провосполительных цитокинов, нежеланием пациенток принимать базисную противовоспалительную терапию. У пациенток с бронхиальной астмой тяжелого течения высокий уровень оксида азота в выдыхаемом воздухе держался на протяжении всей беременности, так как обострения наблюдались на протяжении всей беременности, но все же у некоторых больных с бронхиальной астмой тяжелого течения удавалось достичь хотя бы частичного контроля заболевания и к III триместру уровень оксида азота в выдыхаемом воздухе достоверно снижался по сравнению со II триместром беременности (р<0,05).
При оценке встречаемости генов eNOS полиморфного генотипа 894GT и 894ТТ и мутантного аллеля 894Т выявлено, что мутантный аллель Т достоверно чаще встречался у беременных с бронхиальной астмой (p=0,04), а нормальный генотип 894 GG был достоверно реже, чем в группе сравнения (р=0,01). Что же касается гена Т-786С, полиморфный генотип 786СТ достоверно чаще выявляется у беременных с БА (р=0,03), так же, как и мутантный аллель 786С (р=0,0006). Доказано, что полиморфный генотип 894ТТ и мутантные аллели 894G и 786С достоверно ухудшают течение БА и являются маркером тяжелой БА (р1=0,0006; р2=0,03).
Оценивая влияния eNOS на течение БА во время беременности, выявлено, что беременные с наличием полиморфного генотипа eNOS G894T чаще отмечали ухудшение течения заболевания, по сравнению с беременными, имеющими нормальные гены (r=0,60, p<0,0001). При этом ухудшение течения заболевания во время беременности отметили 32 пациентки, из которых 20 (62,5%) имели полиморфный генотип 894GT и 12 (28,12%) патологическую гомозиготу 894ТТ, а улучшение с патологической гомозиготой не отметила ни одна беременная (р=0,04), с генотипом 894 GT улучшение имели 2 (19,19%) беременных из 9 (р=0,01). Однако, так же выявлено что генотип 894GG достоверно чаще приводит к улучшению течения заболевания в периоде гестации (р<0,05). Генотип Т-786С достоверно не влиял на течение бронхиальной астмы в период гестации.
Для дальнейшего изучения влияния eNOS на течение БА был определен уровень оксида азота в выдыхаемом воздухе в зависимости от наличия полиморфизма генов eNOS G894T и Т-786С, представленные в таблице 1.
Таблица 1. Уровень NOех у больных БА в динамике беременности в зависимости от полиморфизма генов еNOS
|
Полиморфизм генов |
Уровень NOex, ррb |
||
|
1 триместр |
2 триместр |
3 триместр |
|
|
894GG(n=11) |
30,22±2,13 |
30,8±2,10 |
29,4±2,05 |
|
894GT(n=29) |
32,33±3,62 |
34,16±6,11 |
29,4±4,72 |
|
894TT(n=12) |
41,0±4,70* |
41,2±4,38* |
43,2±5,06* |
|
786TT(n=17) |
30,52±2,70 |
29,35±2,85 |
27,23±2,72 |
|
786CT(n=29) |
33,64±2,73 |
34,24±2,52 |
34,14±2,76 |
|
786CC(n=6) |
33,5±5,69 |
39,0±6,81 |
36,0±6,12 |
Примечание: *-статистически значимые различия уровня NOex в зависимости от генотипа, р<0,05.
Самые высокие показатели уровня NOех у больных БА отмечены при наличии патологической гомозиготы 894ТТ с нарастанием во 2, 3 триместрах беременности, в отличие от полиморфизма других генов. Наличие патологической гомозиготы 894ТТ достоверно влияет на выработку NO, который увеличивает значение оксида азота в выдыхаемом воздухе во всех трех триместрах беременности, в отличие от генотипа 894GT, что может являться дополнительным критерием тяжести течения БА и уровня контроля.
Так как доказано, что мутантный ген eNOS 894Т и 786С оказывают влияние на эндотелиальную дисфункцию, была изучена взаимосвязь между наличием мутации и гестоза, а также другими возможными осложнениями беременности и родов, ассоциируемых с дисфункцией эндотелия. Установлены следующие корреляционные связи: eNOS894/гестоз (r=0,31, p=0,02); eNOS786/выкидыш в анамнезе (r=0,29, p=0,034); eNOS894/анемия (r=0,34, p=0,012); eNOS786/перинатальное поражение ЦНС (r=0,39, p=0,003).
В целом, улучшение динамики течения БА в гестационном периоде отмечено при: легком контролируемом течении заболевания, аллергической форме бронхиальной астмы, хорошей приверженности базисной терапии, уровне оксида азота в выдыхаемом воздухе <35 ppb и наличием генотипа еNOex 894GG. Ухудшение динамики течения БА в гестационном периоде отмечено при: тяжелой неконтролируемой БА, неаллергической форме, отсутствии приверженности базисной терапии, оксида азота в выдыхаемом воздухе >40 ppb и генотипе еNOex 894GТ и 894 ТТ.
ЛИТЕРАТУРА
- Лучникова Т.А., Приходько О.Б. Особенности социально-экономического статуса у беременных, больных бронхиальной астмой// Бюл. физиол. и патол. дыхания. 2015. Вып. 56. С. 78-82.
- Лучникова, Т.А., Приходько О.Б. Взаимосвязь уровня контроля бронхиальной астмы и оксида азота в выдыхаемом воздухе у беременных в Амурской области // Ульяновский медико-биологический журнал. 2016. №4. С. 20-26.
- Лучникова Т.А., Приходько О.Б. Особенности клинического течения бронхиальной астмы у беременных в зависимости от уровня оксида азота в выдыхаемом воздухе и содержания витамина D в организме // Бюл. физиол. и патол. дыхания. 2016. Вып. 62. С. 35-39.
- Лучникова Т.А. Перинатальные исходы у беременных с бронхиальной астмой в зависимости от уровня витамина D// Российский вестник перинатологии и педиатрии. 2016 . Т.61. №4. С. 282-283.
- Лучникова, Т.А. Особенности функции внешнего дыхания у беременных больных бронхиальной астмой с позиции уровня контроля заболевания /Т.А. Лучникова, О.Б. Приходько//Аллергология и иммунология. 2016. Т.17. №1. С. 34.
- Лучникова, Т. А., Приходько О.Б. Влияние генетических маркеров эндотелиальной дисфункции на течение бронхиальной астмы во время беременности// Российский аллергологический журнал. 2017. №1. С. 78-80.
- Пасиешвили Т. М. Особенности аллельного полиморфизма гена эндотелиальной NO-синтетазы в формировании генетически детерминированной эндотелиальной дисфункции у больных ожирением и бронхиальной астмой// Научные ведомости БелГУ. Серия: Медицина. Фармация. 2012. №22 (141). С.154-15
- Романцова Е.Б., Бабцева А.Ф., Приходько О.Б. Медико-социальный статус беременных с бронхиальной астмой // International journal on immunorehabilitation. 2009. Т.11, №1. С. 38а.
- Романцова Е.Б., Приходько О.Б., Бабцева А.Ф., Смородина Е.И., Кострова И.В., Лучникова Т.А. Влияние адаптационных возможностей беременных с бронхиальной астмой на здоровье потомства // Медицинская реабилитация в педиатрической практике: достижения, проблемы и перспективы: сборник трудов научно-практической конференции с международным участием под ред. проф. Н.В. Саввиной. Якутск, 2013. С.349-358.
- Prikhodko О.B., Babtseva А.F., Romantsovа Е.B., Grigorenko A.A., Pustovalova V.V. Morphological characteristics of placenta in bronchial asthma patients in the control of its according to treatment // The 8th Sino-Russia forum of biomedical and pharmaceutical science: the conference proceedings. Blagoveshchensk, 2011. P.81 - 82.
1. Luchnikova T.A., Prihod'ko O.B. Osobennosti social'no-ekonomicheskogo statusa u beremennyh, bol'nyh bronhial'noy astmoy // Byul. fiziol. i patol. dyhaniya. 2015. Vyp. 56. S. 78-82.
2. Luchnikova, T.A., Prihod'ko O.B. Vzaimosvyaz' urovnya kontrolya bronhial'noy astmy i oksida azota v vydyhaemom vozduhe u beremennyh v Amurskoy obla-sti // Ul'yanovskiy mediko-biologicheskiy zhurnal. 2016. №4. S. 20-26.
3. Luchnikova T.A., Prihod'ko O.B. Osobennosti klinicheskogo techeniya bronhi-al'noy astmy u beremennyh v zavisimosti ot urovnya oksida azota v vydyha-emom vozduhe i soderzhaniya vitamina D v organizme // Byul. fiziol. i patol. dyhaniya. 2016. Vyp. 62. S. 35-39.
4. Luchnikova T.A. Perinatal'nye ishody u beremennyh s bronhial'noy astmoy v zavisimosti ot urovnya vitamina D // Rossiyskiy vestnik perinatologii i pediatrii. 2016. T.61, №4. S. 282-283.
5. Luchnikova T.A., Prihod'ko O.B. Osobennosti funkcii vneshnego dyhaniya u beremennyh bol'nyh bronhial'noy astmoy s pozicii urovnya kontrolya zabo-levaniya // Allergologiya i immunologiya. 2016. T.17, №1. S. 34.
6. Luchnikova, T. A., Prihod'ko O.B. Vliyanie geneticheskih markerov endoteli-al'noy disfunkcii na techenie bronhial'noy astmy vo vremya beremennosti // Rossiyskiy allergologicheskiy zhurnal. 2017. №1. S. 78-80.
7. Pasieshvili T. M. Osobennosti allel'nogo polimorfizma gena endotelial'-noy NO-sintetazy v formirovanii geneticheski determinirovannoy endote-lial'noy disfunkcii u bol'nyh ozhireniem i bronhial'noy astmoy // Nauch-nye vedomosti BelGU. Seriya: Medicina. Farmaciya. 2012. №22 (141). S.154-157.
8. Romancova E.B., Babceva A.F., Prihod'ko O.B. Mediko-social'nyy status beremennyh s bronhial'noy astmoy // International journal on immunore-habilitation. 2009. T.11, №1. S. 38a.
9. Romancova E.B., Prihod'ko O.B., Babceva A.F., Smorodina E.I., Kostrova I.V., Luchnikova T.A. Vliyanie adaptacionnyh vozmozhnostey beremennyh s bronhial'noy astmoy na zdorov'e potomstva // Medicinskaya reabilitaciya v pediatricheskoy praktike: dostizheniya, problemy i perspektivy: sbornik trudov nauchno-prakticheskoy konferencii s mezhdunarodnym uchastiem pod red. prof. N.V. Savvinoy. Yakutsk, 2013. S.349-358.
10. Prikhodko O.B., Babtseva A.F., Romantsova E.B., Grigorenko A.A., Pustovalova V.V. Morphological characteristics of placenta in bronchial asthma patients in the control of its according to treatment // The 8th Sino-Russia forum of biomedical and pharmaceutical science: the conference proceedings. Blagoveshchensk, 2011. P.81-82.
