с 01.01.2010 по настоящее время Благовещенск, Амурская область, Россия
Благовещенск, Амурская область, Россия
ВАК 14.01.2025 Пульмонология
УДК 61 Медицина. Охрана здоровья
ГРНТИ 76.29 Клиническая медицина
ОКСО 31.06.2001 Клиническая медицина
ББК 53 Клиническая медицина в целом
ББК 541 Внутренние болезни
ББК 571 Гинекология
ТБК 5743 Пульмонология
BISAC MED079000 Pulmonary & Thoracic Medicine
В работе изучались уровень оксида азота в выдыхаемом воздухе (NOex) и гены эндотелиальной синтазы оксида азота у беременных с бронхиальной астмой. Для выявления особенностей NOex были обследованы беременные с аллергической БА в динамике. Выявлено достоверное увеличение NOex на протяжении всего периода гестации. При этом самый высокий уровень отмечен у беременных с БАТТ в III триместре, что связано с большим количеством обострений в этом периоде. Так же выявлено, что у больных с контролируемым течением БА уровень NOex приближается к нормальным цифрам, а при неконтролируемом течении максимальные значения регистрируются во II триместре, что требует корректировки лечения для предупреждения развития обострений. При дальнейшем исследовании генов, участвующих в формировании эндотелиальной дисфункции, выявлено, что патологические аллели гена eNOS 894 и 786 чаще встречались при БА. Наличие полиморфных генов G894Т и T786С достоверно можно считать маркером развития БА, причем имеющаяся патологическая гомозигота в положении 894 обусловливает развитие тяжелой БА. Наличие патологической гомозиготы 894ТТ достоверно влияет на выработку NO, который увеличивает уровень NOex во всех трех триместрах беременности, в отличие от генотипа 894GT, что так же влияет на тяжесть течения БА, уровень контроля и объем необходимой базисной терапии. При наличии полиморфизма генов eNOS 894GT и 894ТТ чаще отмечается ухудшение течения БА в период гестации, в отличие от беременных с БА с нормальным генотипом. Генотип 894GG достоверно улучшает динамику течения БА в периоде гестации.
бронхиальная астма, оксид азота в выдыхаемом воздухе, ген эндотелиальной синтазы оксида азота, беременность, эндотелиальная дисфункция
УДК 616.248-084:618.2-06
Т.А. Лучникова, канд. мед. наук, О.Б. Приходько, д-р мед. наук
ФГБОУ ВО Амурская ГМА Минздрава РФ, г. Благовещенск
ОКСИД АЗОТА В ВЫДЫХАЕМОМ ВОЗДУХЕ И ГЕНЫ ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ СИНТАЗЫ ОКСИДА АЗОТА У БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ В ПЕРИОД ГЕСТАЦИИ
Введение. В Амурской области заболеваемость БА во время беременности составляет 4,8 на 1000 человек [1,2]. При этом в последние годы увеличился процент манифестации БА во время беременности на 2% за счет изменившихся условий окружающей среды, в частности крупномасштабного наводнения в 2013г [1,2,4]. К настоящему времени можно считать доказанным тот факт, что бронхиальная астма не служит противопоказанием к беременности, но своевременная диагностика, индивидуализированный подход к терапии являются необходимым условием благополучного вынашивания ребенка матерью, страдающей этим заболеванием [3,4,8,9,10].
За последние десятки лет проведено множество исследований, касающихся влияния определенных генов на течение БА, в том числе и генов эндотелиальной синтазы (eNOS). В частности, широко обсуждается роль полиморфизма 4а/4b в 4 интроне в утяжелении течения бронхиальной астмы [5,6]. Так же хорошо изучена роль полиморфизма eNOS 894 G>T и 786 T>C при развитии сердечно-сосудистых заболеваний и влияние на сосудистый эндотелий [6,7]. Однако работ по изучению влияния eNOS на уровень оксида азота у больных БА недостаточно.
Цель исследования – определить влияние эндотелиальной синтазы оксида азота на уровень оксида азота в выдыхаемом воздухе при различном течении БА в период гестации.
Материалы и методы: Материалом для молекулярно-генетического исследования послужили образцы ДНК 52 беременных с БА и 30 беременных без бронхолегочной патологии (группа сравнения). В данном исследовании проводилось измерение уровня оксида азота в выдыхаемом воздухе у 52 беременных на всем периоде гестации (NOex) на аппарате NO Breath (Великобритания) в режиме on-line в каждом триместре беременности и при каждом обострении БА.
Анализ генетических полиморфизмов осуществляли коммерческими наборами реагентов методом аллель-специфичной полимеразной цепной реакции (ПЦР) в «режиме реального времени» со снятием кривых плавления продуктов амплификации. Анализ результатов ПЦР проводили в автоматическом режиме программного обеспечения, детектирующего амплификатора Дтпрайм (ООО «ДНК-Технология», Россия). Исследовали следующие полиморфные варианты генов эндотелиальной синтазы оксида азота (eNOS) 786 T>C, 894G>T. Наблюдаемое распределение полиморфных генов метаболизма фолатов, соответствовало равновесию Харди-Вайнберга во всех группах беременных, как с БА, так и в группе сравнения. Полученные результаты обрабатывались в программе STATISTICA 6.1, методами непараметрической статистики с применением двустороннего точного критерия Фишера, статистически достоверными считались различия при р <0,05.
Результаты исследования и их обсуждение. В ходе исследования было установлено, что уровень NOex у беременных с БА с различными степенями тяжести и уровнями контроля, в среднем, составил в I триместре – 36,83±13,22 ррb, во II триместре – 35,14±12,94ppb, в III триместре – 32,45±12,31ppb. Из приведенных данных следует, что уровень оксида азота в выдыхаемом воздухе на всем протяжении гестации был достоверно выше границ нормы у взрослых (NOex=25 ppb). существует прямая зависимость между степенью тяжести заболевания и уровнем оксида азота в выдыхаемом воздухе. Так, отмечена тенденция к повышению уровня NOex в зависимости от триместра беременности и степени тяжести. При бронхиальной астме легкой степени и средней степени наибольший уровень оксида азота в выдыхаемом воздухе определялся в I триместре. Это связанно с изменением гормонального фона женщины, увеличением уровня провосполительных цитокинов, нежеланием пациенток принимать базисную противовоспалительную терапию. У пациенток с бронхиальной астмой тяжелого течения высокий уровень оксида азота в выдыхаемом воздухе держался на протяжении всей беременности, так как обострения наблюдались на протяжении всей беременности, но все же у некоторых больных с бронхиальной астмой тяжелого течения удавалось достичь хотя бы частичного контроля заболевания и к III триместру уровень оксида азота в выдыхаемом воздухе достоверно снижался по сравнению со II триместром беременности (р<0,05).
При оценке встречаемости генов eNOS полиморфного генотипа 894GT и 894ТТ и мутантного аллеля 894Т выявлено, что мутантный аллель Т достоверно чаще встречался у беременных с бронхиальной астмой (p=0,04), а нормальный генотип 894 GG был достоверно реже, чем в группе сравнения (р=0,01). Что же касается гена Т-786С, полиморфный генотип 786СТ достоверно чаще выявляется у беременных с БА (р=0,03), так же, как и мутантный аллель 786С (р=0,0006). Доказано, что полиморфный генотип 894ТТ и мутантные аллели 894G и 786С достоверно ухудшают течение БА и являются маркером тяжелой БА (р1=0,0006; р2=0,03).
Оценивая влияния eNOS на течение БА во время беременности, выявлено, что беременные с наличием полиморфного генотипа eNOS G894T чаще отмечали ухудшение течения заболевания, по сравнению с беременными, имеющими нормальные гены (r=0,60, p<0,0001). При этом ухудшение течения заболевания во время беременности отметили 32 пациентки, из которых 20 (62,5%) имели полиморфный генотип 894GT и 12 (28,12%) патологическую гомозиготу 894ТТ, а улучшение с патологической гомозиготой не отметила ни одна беременная (р=0,04), с генотипом 894 GT улучшение имели 2 (19,19%) беременных из 9 (р=0,01). Однако, так же выявлено что генотип 894GG достоверно чаще приводит к улучшению течения заболевания в периоде гестации (р<0,05). Генотип Т-786С достоверно не влиял на течение бронхиальной астмы в период гестации.
Для дальнейшего изучения влияния eNOS на течение БА был определен уровень оксида азота в выдыхаемом воздухе в зависимости от наличия полиморфизма генов eNOS G894T и Т-786С, представленные в таблице 1.
Таблица 1. Уровень NOех у больных БА в динамике беременности в зависимости от полиморфизма генов еNOS
|
Полиморфизм генов |
Уровень NOex, ррb |
||
|
1 триместр |
2 триместр |
3 триместр |
|
|
894GG(n=11) |
30,22±2,13 |
30,8±2,10 |
29,4±2,05 |
|
894GT(n=29) |
32,33±3,62 |
34,16±6,11 |
29,4±4,72 |
|
894TT(n=12) |
41,0±4,70* |
41,2±4,38* |
43,2±5,06* |
|
786TT(n=17) |
30,52±2,70 |
29,35±2,85 |
27,23±2,72 |
|
786CT(n=29) |
33,64±2,73 |
34,24±2,52 |
34,14±2,76 |
|
786CC(n=6) |
33,5±5,69 |
39,0±6,81 |
36,0±6,12 |
Примечание: *-статистически значимые различия уровня NOex в зависимости от генотипа, р<0,05.
Самые высокие показатели уровня NOех у больных БА отмечены при наличии патологической гомозиготы 894ТТ с нарастанием во 2, 3 триместрах беременности, в отличие от полиморфизма других генов. Наличие патологической гомозиготы 894ТТ достоверно влияет на выработку NO, который увеличивает значение оксида азота в выдыхаемом воздухе во всех трех триместрах беременности, в отличие от генотипа 894GT, что может являться дополнительным критерием тяжести течения БА и уровня контроля.
Так как доказано, что мутантный ген eNOS 894Т и 786С оказывают влияние на эндотелиальную дисфункцию, была изучена взаимосвязь между наличием мутации и гестоза, а также другими возможными осложнениями беременности и родов, ассоциируемых с дисфункцией эндотелия. Установлены следующие корреляционные связи: eNOS894/гестоз (r=0,31, p=0,02); eNOS786/выкидыш в анамнезе (r=0,29, p=0,034); eNOS894/анемия (r=0,34, p=0,012); eNOS786/перинатальное поражение ЦНС (r=0,39, p=0,003).
В целом, улучшение динамики течения БА в гестационном периоде отмечено при: легком контролируемом течении заболевания, аллергической форме бронхиальной астмы, хорошей приверженности базисной терапии, уровне оксида азота в выдыхаемом воздухе <35 ppb и наличием генотипа еNOex 894GG. Ухудшение динамики течения БА в гестационном периоде отмечено при: тяжелой неконтролируемой БА, неаллергической форме, отсутствии приверженности базисной терапии, оксида азота в выдыхаемом воздухе >40 ppb и генотипе еNOex 894GТ и 894 ТТ.
ЛИТЕРАТУРА
- Лучникова Т.А., Приходько О.Б. Особенности социально-экономического статуса у беременных, больных бронхиальной астмой// Бюл. физиол. и патол. дыхания. 2015. Вып. 56. С. 78-82.
- Лучникова, Т.А., Приходько О.Б. Взаимосвязь уровня контроля бронхиальной астмы и оксида азота в выдыхаемом воздухе у беременных в Амурской области // Ульяновский медико-биологический журнал. 2016. №4. С. 20-26.
- Лучникова Т.А., Приходько О.Б. Особенности клинического течения бронхиальной астмы у беременных в зависимости от уровня оксида азота в выдыхаемом воздухе и содержания витамина D в организме // Бюл. физиол. и патол. дыхания. 2016. Вып. 62. С. 35-39.
- Лучникова Т.А. Перинатальные исходы у беременных с бронхиальной астмой в зависимости от уровня витамина D// Российский вестник перинатологии и педиатрии. 2016 . Т.61. №4. С. 282-283.
- Лучникова, Т.А. Особенности функции внешнего дыхания у беременных больных бронхиальной астмой с позиции уровня контроля заболевания /Т.А. Лучникова, О.Б. Приходько//Аллергология и иммунология. 2016. Т.17. №1. С. 34.
- Лучникова, Т. А., Приходько О.Б. Влияние генетических маркеров эндотелиальной дисфункции на течение бронхиальной астмы во время беременности// Российский аллергологический журнал. 2017. №1. С. 78-80.
- Пасиешвили Т. М. Особенности аллельного полиморфизма гена эндотелиальной NO-синтетазы в формировании генетически детерминированной эндотелиальной дисфункции у больных ожирением и бронхиальной астмой// Научные ведомости БелГУ. Серия: Медицина. Фармация. 2012. №22 (141). С.154-15
- Романцова Е.Б., Бабцева А.Ф., Приходько О.Б. Медико-социальный статус беременных с бронхиальной астмой // International journal on immunorehabilitation. 2009. Т.11, №1. С. 38а.
- Романцова Е.Б., Приходько О.Б., Бабцева А.Ф., Смородина Е.И., Кострова И.В., Лучникова Т.А. Влияние адаптационных возможностей беременных с бронхиальной астмой на здоровье потомства // Медицинская реабилитация в педиатрической практике: достижения, проблемы и перспективы: сборник трудов научно-практической конференции с международным участием под ред. проф. Н.В. Саввиной. Якутск, 2013. С.349-358.
- Prikhodko О.B., Babtseva А.F., Romantsovа Е.B., Grigorenko A.A., Pustovalova V.V. Morphological characteristics of placenta in bronchial asthma patients in the control of its according to treatment // The 8th Sino-Russia forum of biomedical and pharmaceutical science: the conference proceedings. Blagoveshchensk, 2011. P.81 - 82.
1. Лучникова Т.А., Приходько О.Б. Особенности социально-экономического статуса у беременных, больных бронхиальной астмой // Бюл. физиол. и патол. дыхания. 2015. Вып. 56. С. 78-82.
2. Лучникова, Т.А., Приходько О.Б. Взаимосвязь уровня контроля бронхиальной астмы и оксида азота в выдыхаемом воздухе у беременных в Амурской обла-сти // Ульяновский медико-биологический журнал. 2016. №4. С. 20-26.
3. Лучникова Т.А., Приходько О.Б. Особенности клинического течения бронхи-альной астмы у беременных в зависимости от уровня оксида азота в выдыха-емом воздухе и содержания витамина D в организме // Бюл. физиол. и патол. дыхания. 2016. Вып. 62. С. 35-39.
4. Лучникова Т.А. Перинатальные исходы у беременных с бронхиальной астмой в зависимости от уровня витамина D // Российский вестник перинатологии и педиатрии. 2016. Т.61, №4. С. 282-283.
5. Лучникова Т.А., Приходько О.Б. Особенности функции внешнего дыхания у беременных больных бронхиальной астмой с позиции уровня контроля забо-левания // Аллергология и иммунология. 2016. Т.17, №1. С. 34.
6. Лучникова, Т. А., Приходько О.Б. Влияние генетических маркеров эндотели-альной дисфункции на течение бронхиальной астмы во время беременности // Российский аллергологический журнал. 2017. №1. С. 78-80.
7. Пасиешвили Т. М. Особенности аллельного полиморфизма гена эндотелиаль-ной NO-синтетазы в формировании генетически детерминированной эндоте-лиальной дисфункции у больных ожирением и бронхиальной астмой // Науч-ные ведомости БелГУ. Серия: Медицина. Фармация. 2012. №22 (141). С.154-157.
8. Романцова Е.Б., Бабцева А.Ф., Приходько О.Б. Медико-социальный статус беременных с бронхиальной астмой // International journal on immunore-habilitation. 2009. Т.11, №1. С. 38а.
9. Романцова Е.Б., Приходько О.Б., Бабцева А.Ф., Смородина Е.И., Кострова И.В., Лучникова Т.А. Влияние адаптационных возможностей беременных с бронхиальной астмой на здоровье потомства // Медицинская реабилитация в педиатрической практике: достижения, проблемы и перспективы: сборник трудов научно-практической конференции с международным участием под ред. проф. Н.В. Саввиной. Якутск, 2013. С.349-358.
10. Prikhodko О.B., Babtseva А.F., Romantsovа Е.B., Grigorenko A.A., Pustovalova V.V. Morphological characteristics of placenta in bronchial asthma patients in the control of its according to treatment // The 8th Sino-Russia forum of biomedical and pharmaceutical science: the conference proceedings. Blagoveshchensk, 2011. P.81-82.
