Blagoveschensk, Blagoveshchensk, Russian Federation
Blagoveschensk, Blagoveshchensk, Russian Federation
Blagoveschensk, Blagoveshchensk, Russian Federation
Blagoveschensk, Blagoveshchensk, Russian Federation
UDK 61 Медицина. Охрана здоровья
GRNTI 76.03 Медико-биологические дисциплины
OKSO 31.08.01 Акушерство и гинекология
BBK 54 Клиническая медицина
TBK 571 Медикобиологические дисциплины
BISAC MED068000 Pathophysiology
A method is proposed for predicting anemia in pregnant women with cytomegalovirus infection, based on the determination of arachidonic acid, TBA-active products, and total hemoglobin in peripheral blood erythrocytes.
pregnancy, anemia, cytomegalovirus infection, arachidonic acid, TBA-active products, total hemoglobin
Цитомегаловирусная (ЦМВ) инфекция продолжает оставаться одной из наиболее распространенных причин патологии в акушерской практике, часто приводя к нарушениям беременности, а также к перинатальной патологии [3].
Обострение ЦМВ инфекции в период гестации ассоциировано с активацией процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ), с избыточным накоплением вторичных продуктов, в том числе, малонового диальдегида (МДА) [7, 8], который оказывает негативное воздействие на ферменты, тем самым подавляя процессы тканевого дыхания. Активные формы кислорода, обладая токсическим действием на клетки, обеспечивают повышение содержания фактора некроза опухолей в организме женщины, в результате чего увеличивается выраженность деструктивных и воспалительных процессов в тканях, выделяется много веществ, способствующих развитию эндогенной интоксикации. В дополнение к вышеизложенному, ПОЛ приводит к нарушению стабильного состояния мембран эритроцитов за счет изменения их липидного состава [5, 9, 11].
Ранее мы установили, что в условиях ЦМВ инфекции угнетается антиоксидантный потенциал организма беременной женщины, как за счет ферментативного звена (уменьшение активности эритроцитарной супероксиддисмутазы), так и неферментных антиоксидантов (уменьшение уровня α-токоферола) [2, 6].
Следовательно, развивающийся окислительный стресс у беременных с обострением ЦМВ инфекции может быть причиной развития анемии, что объясняется наличием вторичных продуктов ПОЛ и свободных жирных кислот, которые способствуют повреждению эритроцитов [1, 18], вызывая кластеризацию мембраны и окислительную модификацию гемоглобина [15].
По результатам зарубежных исследователей установлено, что высокая концентрация продуктов пероксидации липидов, арахидоновой кислоты вызывает реакции окислительного стресса, повреждая эритроциты и гемоглобин [14]. Также отмечено, что развитие анемии тесно связано с формированием окислительного стресса и снижением антиоксидантной защиты [16, 17].
Первичные продукты ПОЛ, будучи веществами, весьма нестойкими, довольно быстро разрушаются с образованием вторичных продуктов: альдегидов, кетонов, спиртов и эпоксинов. Среди них наиболее известен МДА, определяемый по реакции с тиобарбитуровой кислотой (ТБК) и поэтому составляющий основной компонент группы, так называемых ТБК-активных веществ. МДА оказывает повреждающее действие, прежде всего, на мембраны клеток, изменяя физические и биологические свойства мембран (микровязкость, текучесть, гидрофильность), способствуя развитию эндотелиальной интоксикации [10]. Повышение содержания продуктов ПОЛ приводит к нарушению проницаемости и биофизических свойств мембран клеток [13], разрушению веществ, обладающих антиоксидантной способностью – витамины, стероидные гормоны, убихинон и др. Помимо этого, ТБК-активные продукты реагируя с SH- и СН3-группами белков, изменяют активность ферментов: цитохромоксидазы (подавляя тем самым тканевое дыхание), гидролазы, осуществляющей превращение холестерола в желчные кислоты [12].
Вышеизложенные данные о патогенетической роли продуктов пероксидации липидов, свободных жирных кислот в развитии анемических состояний, определяют необходимость разработки способов прогнозирования анемии с целью определения факторов риска угрожающего течения беременности.
Новизна заявляемого способа заключается в определении с учетом значений арахидоновой кислоты, ТБК-активных продуктов и концентрации общего гемоглобина в эритроцитах периферической крови у беременных женщин с выявленной ЦМВ инфекцией, прогностического индекса ПИ, по отношению которого к граничному значению дискриминантной функции прогнозируют анемию при ЦМВ инфекции в период беременности. Ранее совокупность указанных признаков в прогнозировании анемии при ЦМВ инфекции у беременных не использовалась.
Задачей исследования явилась разработка способа прогнозирования анемии у беременных при ЦМВ инфекции, путем определения в мембране эритроцитов периферической крови арахидоновой кислоты, ТБК-активных продуктов и общего гемоглобина.
Способ осуществляется следующим образом. Для получения диагностических критериев были исследованы эритроциты периферической крови 35 женщин с обострением ЦМВ инфекции и 35 ЦМВ-серонегативных женщин. У обследуемых женщин производили забор крови в стандартные пробирки с коагулянтом. После центрифугирования крови осадок эритроцитарной массы использовали для выявления миристиновой кислоты методом газожидкостной хроматографии хроматографии с помощью программно-аппаратного комплекса Хроматэк Аналитик 2,5 (Россия) по времени удерживания с использованием стандартов жирных кислот фирмы «Supelco» (США). Концентрацию ТБК-активных продуктов (ммоль/л) исследовали спектрофотометрическим методом по В.Б. Гаврилову [4], содержание общего гемоглобина (г/л) методом фотометрии на гематологическом анализаторе «Medonic M» (Швейцария). С помощью дискриминантного уравнения определяли прогностический индекс
ПИ= -153,998-17,62×АК+11,418×ТБК-АП+0,555×Hb,
где ПИ – прогностический индекс дискриминантной функции, граничное значение которого 51,341.
Определяют прогноз развития анемии при ЦМВ инфекции в период беременности: при ПИ равной или больше граничного значения, прогнозируют анемию, при ПИ меньше граничного значения – прогнозируют отсутствие риска анемии.
Вероятность правильного прогноза составляет 90%.
Правильность выводов была подтверждена следующими примерами.
Пример 1. Беременная В., 22г., находилась на стационарном лечении в гинекологическом отделении Городской клинической больницы (г. Благовещенск). Проведен общий анализ крови и анализ на TORCH-инфекции. По ИФА выявлены антитела IgM к ЦМВ, титр антител IgG составил 1600, индекс авидности – 84%. Количество эритроцитов в крови 4,1×1012 /л.
Диагноз: Беременность 10-11 недель. Хроническая ЦМВ инфекция, стадия обострения.
По заявленному способу содержание в эритроцитах крови арахидоновой кислоты составило 3,50%, ТБК-активных продуктов – 18,18 ммоль/л и общего гемоглобина – 108 г/л. Дискриминантная функция составила 51,85. Прогнозировалась анемия.
Проведено дополнительное исследование крови на содержание оксигемоглобина. Его значения составили 90%, что ниже нормы (100%).
Прогноз по заявленному способу подтвердился.
Пример 2. Беременная М., 20 л., находилась на стационарном лечении в гинекологическом отделении Городской клинической больницы (г. Благовещенск). Гинекологический анамнез осложнен: 1 медицинский аборт без осложнений. Проведен общий анализ крови и анализ на TORCH-инфекции. По ИФА титр антител IgG – 800, индекс авидности – 95%. Количество эритроцитов в крови 4,3×1012 /л.
Диагноз: Беременность 14-15 недель. Хроническая МЦВ инфекция, латентная стадия.
По заявленному способу содержание в эритроцитах крови арахидоновой кислоты составило 2,85%, ТБК-активных продуктов 7,80 ммоль/л и общего гемоглобина – 115 г/л. Дискриминантная функция составила -55,215. Отсутствие риска анемии в период беременности.
Дополнительное исследование крови на содержание оксигемоглобина показало, что его значения (99%) не отличаются от нормативных показателей (100%).
Прогноз по заявленному способу подтвердился.
Таким образом, представленные результаты позволяют установить важную роль нарушений содержания арахидоновой кислоты, ТБК-активных продуктов, общего гемоглобина в прогнозировании анемии у беременных женщин с ЦМВ инфекцией, что может быть основой для расширения диагностической и лечебной базы при данной патологии беременных.
1. Andrievskaya I.A., Ishutina N.A. Sposob prognozirovaniya anemii u beremennyh pri citomegalovirusnoy infekcii: patent RF №2710588 ot 30.12.2019.
2. Andrievskaya I.A., Ishutina N.A., Kutepova O.L. Svobodnoradikal'noe okislenie i oksigenaciya gemoglobina pri obostrenii citomegalovirusnoy infekcii vo vtorom trimestre beremennosti // Acta biomedica scientifica. 2018. T. 3, №4. S. 9-14.
3. Belyaeva N.R. Citomegalovirusnaya infekciya i reprodukivnoe zdorov'e zhenschin // Zhurnal akusherstva i zhenskih bolezney. 2016. T. 65, №4. S. 24-33.
4. Gavrilov V.B., Gavrilova A.R., Mazhul' L.M. Analiz metodov opredeleniya produktov perekisnogo okisleniya lipidov v syvorotke krovi po testu s tiobarbiturovoy kislotoy // Voprosy medicinskoy himii. 1987. №1. S.118-122.
5. Ishutina N.A. Vzaimosvyaz' izmeneniy ɷ-3 i ɷ-6 polinenasyschennyh zhirnyh kislot pri beremennosti, oslozhnennoy gerpes-virusnoy infekciey // Fundamental'nye issledovaniya. 2010. №32(24). S. 98-100.
6. Ishutina N.A., Andrievskaya I.A., Kutepova O.L., Mironenko A.G. Vliyanie processov perekisnogo okisleniya lipidov na kislorodtransportnye svoystva gemoglobina v eritrocitah perifericheskoy krovi beremennyh s citomegalovirusnoy infekciey // Byulleten' VSNC SO RAMN. 2014. №2(96). S.
7. Ishutina N.A., Dorofienko N.N. Peroksidaciya lipidov pri beremennosti, oslozhnennoy citomegalovirusnoy infekciey // Byulleten' fiziologii i patologii dyhaniya. 2014. Vyp. 54. S.66-69.
8. Ishutina N.A., Dorofienko N.N., Andrievskaya I.A. Malonovyy dial'degid i faktor nekroza opuholey α v perifericheskoy krovi beremennyh s citomegalovirusnoy infekciey // Byulleten' fiziologii i patologii dyhaniya. 2015. Vyp. 55. S. 78-81.
9. Katkova N.Yu. Issledovanie antioksidantnogo statusa u beremennyh s fetoplacentarnoy nedostatochnost'yu iz grupp riska po vnutriutrobnomu inficirovaniyu // Profilakticheskaya i klinicheskaya medicina. 2008. №4. S. 60-63.
10. Kokoeva F.B., Torchinov A.M., Cahilova S.G., Balios L.V., Kuznecov V.P., Saharova D.H. Rol' okislitel'nogo stressa v patogeneze preeklampsii (obzor literatury) // Problemy reprodukcii. 2014. №4. S. 7-10.
11. Lucenko M.T., Andrievskaya I.A., Ishutina N.A. Sposob ocenki strukturno-funkcional'nogo sostoyaniya membran eritrocitov perifericheskoy krovi u beremennyh pri obostrenii gerpes-virusnoy infekcii: patent RF №2389021 ot 10.05.2010.
12. Marzhohova M.Yu., Afashagova M.M., Marzhohova A.R. Malonovyy dial'degid i faktor nekroza opuholey α kak pokazateli sindroma intoksikacii pri rozhistom vospalenii // Klin. lab. diagnostika. 2011. №5. S. 20-22.
13. Tugusheva F.A. Processy perekisnogo okisleniya lipidov i zaschitnaya rol' antioksidantnoy sistemy v norme i u bol'nyh s hronicheskim glomerulonefritom // Nefrologiya. 2001. №5(1). 19-22.
14. Arachidonic acid causes hidden blood loss-like red blood cell damagethrough oxidative stress reactions / T.Yuan et al. // Surg Res. 2017. V. 211. P.14-20.
15. Revin V.V., Filatova S.M., Syusin I.V. Study of correlation between state and composition of lipid phase and change in erythrocytes structure under induction of oxidative processes // Int J Hematol. 2015. V. 101(5). P. 487-496.
16. Evaluation of oxidative stress and antioxidant status in pregnant anemic women / A.K. Tiwari et al. // Indian J. Clin. Biochem. 2010. V. 25(4). P. 411-418.
17. Tiwari A.K., Mahdi A.A., Zahra F., Sharma S., Negi M.P. Evaluation of Low Blood Lead Levels and Its Association with Oxidative Stress in Pregnant Anemic Women: A Comparative Prospective // Indian J. Clin. Biochem. 2012. V. 27(3). P. 246-252.
18. Weiss G., Goodnough L.T. Anemia of chronic disease // N. Engl. J. Med. 2005. V. 352. P. 1011-1023.
