Благовещенск, Амурская область, Россия
Благовещенск, Амурская область, Россия
Благовещенск, Амурская область, Россия
Благовещенск, Амурская область, Россия
УДК 61 Медицина. Охрана здоровья
ГРНТИ 76.03 Медико-биологические дисциплины
ОКСО 31.08.01 Акушерство и гинекология
ББК 54 Клиническая медицина
ТБК 571 Медикобиологические дисциплины
BISAC MED068000 Pathophysiology
Предложен способ прогнозирования анемии у беременных при цитомегаловирусной инфекции, основанный на определении в эритроцитах периферической крови арахидоновой кислоты, ТБК-активных продуктов, общего гемоглобина
беременность, анемия, цитомегаловирусная инфекция, арахидоновая кислота, ТБК-активные продукты, общий гемоглобин
Цитомегаловирусная (ЦМВ) инфекция продолжает оставаться одной из наиболее распространенных причин патологии в акушерской практике, часто приводя к нарушениям беременности, а также к перинатальной патологии [3].
Обострение ЦМВ инфекции в период гестации ассоциировано с активацией процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ), с избыточным накоплением вторичных продуктов, в том числе, малонового диальдегида (МДА) [7, 8], который оказывает негативное воздействие на ферменты, тем самым подавляя процессы тканевого дыхания. Активные формы кислорода, обладая токсическим действием на клетки, обеспечивают повышение содержания фактора некроза опухолей в организме женщины, в результате чего увеличивается выраженность деструктивных и воспалительных процессов в тканях, выделяется много веществ, способствующих развитию эндогенной интоксикации. В дополнение к вышеизложенному, ПОЛ приводит к нарушению стабильного состояния мембран эритроцитов за счет изменения их липидного состава [5, 9, 11].
Ранее мы установили, что в условиях ЦМВ инфекции угнетается антиоксидантный потенциал организма беременной женщины, как за счет ферментативного звена (уменьшение активности эритроцитарной супероксиддисмутазы), так и неферментных антиоксидантов (уменьшение уровня α-токоферола) [2, 6].
Следовательно, развивающийся окислительный стресс у беременных с обострением ЦМВ инфекции может быть причиной развития анемии, что объясняется наличием вторичных продуктов ПОЛ и свободных жирных кислот, которые способствуют повреждению эритроцитов [1, 18], вызывая кластеризацию мембраны и окислительную модификацию гемоглобина [15].
По результатам зарубежных исследователей установлено, что высокая концентрация продуктов пероксидации липидов, арахидоновой кислоты вызывает реакции окислительного стресса, повреждая эритроциты и гемоглобин [14]. Также отмечено, что развитие анемии тесно связано с формированием окислительного стресса и снижением антиоксидантной защиты [16, 17].
Первичные продукты ПОЛ, будучи веществами, весьма нестойкими, довольно быстро разрушаются с образованием вторичных продуктов: альдегидов, кетонов, спиртов и эпоксинов. Среди них наиболее известен МДА, определяемый по реакции с тиобарбитуровой кислотой (ТБК) и поэтому составляющий основной компонент группы, так называемых ТБК-активных веществ. МДА оказывает повреждающее действие, прежде всего, на мембраны клеток, изменяя физические и биологические свойства мембран (микровязкость, текучесть, гидрофильность), способствуя развитию эндотелиальной интоксикации [10]. Повышение содержания продуктов ПОЛ приводит к нарушению проницаемости и биофизических свойств мембран клеток [13], разрушению веществ, обладающих антиоксидантной способностью – витамины, стероидные гормоны, убихинон и др. Помимо этого, ТБК-активные продукты реагируя с SH- и СН3-группами белков, изменяют активность ферментов: цитохромоксидазы (подавляя тем самым тканевое дыхание), гидролазы, осуществляющей превращение холестерола в желчные кислоты [12].
Вышеизложенные данные о патогенетической роли продуктов пероксидации липидов, свободных жирных кислот в развитии анемических состояний, определяют необходимость разработки способов прогнозирования анемии с целью определения факторов риска угрожающего течения беременности.
Новизна заявляемого способа заключается в определении с учетом значений арахидоновой кислоты, ТБК-активных продуктов и концентрации общего гемоглобина в эритроцитах периферической крови у беременных женщин с выявленной ЦМВ инфекцией, прогностического индекса ПИ, по отношению которого к граничному значению дискриминантной функции прогнозируют анемию при ЦМВ инфекции в период беременности. Ранее совокупность указанных признаков в прогнозировании анемии при ЦМВ инфекции у беременных не использовалась.
Задачей исследования явилась разработка способа прогнозирования анемии у беременных при ЦМВ инфекции, путем определения в мембране эритроцитов периферической крови арахидоновой кислоты, ТБК-активных продуктов и общего гемоглобина.
Способ осуществляется следующим образом. Для получения диагностических критериев были исследованы эритроциты периферической крови 35 женщин с обострением ЦМВ инфекции и 35 ЦМВ-серонегативных женщин. У обследуемых женщин производили забор крови в стандартные пробирки с коагулянтом. После центрифугирования крови осадок эритроцитарной массы использовали для выявления миристиновой кислоты методом газожидкостной хроматографии хроматографии с помощью программно-аппаратного комплекса Хроматэк Аналитик 2,5 (Россия) по времени удерживания с использованием стандартов жирных кислот фирмы «Supelco» (США). Концентрацию ТБК-активных продуктов (ммоль/л) исследовали спектрофотометрическим методом по В.Б. Гаврилову [4], содержание общего гемоглобина (г/л) методом фотометрии на гематологическом анализаторе «Medonic M» (Швейцария). С помощью дискриминантного уравнения определяли прогностический индекс
ПИ= -153,998-17,62×АК+11,418×ТБК-АП+0,555×Hb,
где ПИ – прогностический индекс дискриминантной функции, граничное значение которого 51,341.
Определяют прогноз развития анемии при ЦМВ инфекции в период беременности: при ПИ равной или больше граничного значения, прогнозируют анемию, при ПИ меньше граничного значения – прогнозируют отсутствие риска анемии.
Вероятность правильного прогноза составляет 90%.
Правильность выводов была подтверждена следующими примерами.
Пример 1. Беременная В., 22г., находилась на стационарном лечении в гинекологическом отделении Городской клинической больницы (г. Благовещенск). Проведен общий анализ крови и анализ на TORCH-инфекции. По ИФА выявлены антитела IgM к ЦМВ, титр антител IgG составил 1600, индекс авидности – 84%. Количество эритроцитов в крови 4,1×1012 /л.
Диагноз: Беременность 10-11 недель. Хроническая ЦМВ инфекция, стадия обострения.
По заявленному способу содержание в эритроцитах крови арахидоновой кислоты составило 3,50%, ТБК-активных продуктов – 18,18 ммоль/л и общего гемоглобина – 108 г/л. Дискриминантная функция составила 51,85. Прогнозировалась анемия.
Проведено дополнительное исследование крови на содержание оксигемоглобина. Его значения составили 90%, что ниже нормы (100%).
Прогноз по заявленному способу подтвердился.
Пример 2. Беременная М., 20 л., находилась на стационарном лечении в гинекологическом отделении Городской клинической больницы (г. Благовещенск). Гинекологический анамнез осложнен: 1 медицинский аборт без осложнений. Проведен общий анализ крови и анализ на TORCH-инфекции. По ИФА титр антител IgG – 800, индекс авидности – 95%. Количество эритроцитов в крови 4,3×1012 /л.
Диагноз: Беременность 14-15 недель. Хроническая МЦВ инфекция, латентная стадия.
По заявленному способу содержание в эритроцитах крови арахидоновой кислоты составило 2,85%, ТБК-активных продуктов 7,80 ммоль/л и общего гемоглобина – 115 г/л. Дискриминантная функция составила -55,215. Отсутствие риска анемии в период беременности.
Дополнительное исследование крови на содержание оксигемоглобина показало, что его значения (99%) не отличаются от нормативных показателей (100%).
Прогноз по заявленному способу подтвердился.
Таким образом, представленные результаты позволяют установить важную роль нарушений содержания арахидоновой кислоты, ТБК-активных продуктов, общего гемоглобина в прогнозировании анемии у беременных женщин с ЦМВ инфекцией, что может быть основой для расширения диагностической и лечебной базы при данной патологии беременных.
1. Андриевская И.А., Ишутина Н.А. Способ прогнозирования анемии у беременных при цитомегаловирусной инфекции: патент РФ №2710588 от 30.12.2019.
2. Андриевская И.А., Ишутина Н.А., Кутепова О.Л. Свободнорадикальное окисление и оксигенация гемоглобина при обострении цитомегаловирусной инфекции во втором триместре беременности // Acta biomedica scientifica. 2018. Т. 3, №4. С. 9-14.
3. Беляева Н.Р. Цитомегаловирусная инфекция и репродукивное здоровье женщин // Журнал акушерства и женских болезней. 2016. Т. 65, №4. С. 24-33.
4. Гаврилов В.Б., Гаврилова А.Р., Мажуль Л.М. Анализ методов определения продуктов перекисного окисления липидов в сыворотке крови по тесту с тиобарбитуровой кислотой // Вопросы медицинской химии. 1987. №1. С.118-122.
5. Ишутина Н.А. Взаимосвязь изменений ɷ-3 и ɷ-6 полиненасыщенных жирных кислот при беременности, осложненной герпес-вирусной инфекцией // Фундаментальные исследования. 2010. №32(24). С. 98-100.
6. Ишутина Н.А., Андриевская И.А., Кутепова О.Л., Мироненко А.Г. Влияние процессов перекисного окисления липидов на кислородтранспортные свойства гемоглобина в эритроцитах периферической крови беременных с цитомегаловирусной инфекцией // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. 2014. №2(96). С.
7. Ишутина Н.А., Дорофиенко Н.Н. Пероксидация липидов при беременности, осложненной цитомегаловирусной инфекцией // Бюллетень физиологии и патологии дыхания. 2014. Вып. 54. С.66-69.
8. Ишутина Н.А., Дорофиенко Н.Н., Андриевская И.А. Малоновый диальдегид и фактор некроза опухолей α в периферической крови беременных с цитомегаловирусной инфекцией // Бюллетень физиологии и патологии дыхания. 2015. Вып. 55. С. 78-81.
9. Каткова Н.Ю. Исследование антиоксидантного статуса у беременных с фетоплацентарной недостаточностью из групп риска по внутриутробному инфицированию // Профилактическая и клиническая медицина. 2008. №4. С. 60-63.
10. Кокоева Ф.Б., Торчинов А.М., Цахилова С.Г., Балиос Л.В., Кузнецов В.П., Сахарова Д.Х. Роль окислительного стресса в патогенезе преэклампсии (обзор литературы) // Проблемы репродукции. 2014. №4. С. 7-10.
11. Луценко М.Т., Андриевская И.А., Ишутина Н.А. Способ оценки структурно-функционального состояния мембран эритроцитов периферической крови у беременных при обострении герпес-вирусной инфекции: патент РФ №2389021 от 10.05.2010.
12. Маржохова М.Ю., Афашагова М.М., Маржохова А.Р. Малоновый диальдегид и фактор некроза опухолей α как показатели синдрома интоксикации при рожистом воспалении // Клин. лаб. диагностика. 2011. №5. С. 20-22.
13. Тугушева Ф.А. Процессы перекисного окисления липидов и защитная роль антиоксидантной системы в норме и у больных с хроническим гломерулонефритом // Нефрология. 2001. №5(1). 19-22.
14. Arachidonic acid causes hidden blood loss-like red blood cell damagethrough oxidative stress reactions / T.Yuan et al. // Surg Res. 2017. V. 211. P.14-20.
15. Revin V.V., Filatova S.M., Syusin I.V. Study of correlation between state and composition of lipid phase and change in erythrocytes structure under induction of oxidative processes // Int J Hematol. 2015. V. 101(5). P. 487-496.
16. Evaluation of oxidative stress and antioxidant status in pregnant anemic women / A.K. Tiwari et al. // Indian J. Clin. Biochem. 2010. V. 25(4). P. 411-418.
17. Tiwari A.K., Mahdi A.A., Zahra F., Sharma S., Negi M.P. Evaluation of Low Blood Lead Levels and Its Association with Oxidative Stress in Pregnant Anemic Women: A Comparative Prospective // Indian J. Clin. Biochem. 2012. V. 27(3). P. 246-252.
18. Weiss G., Goodnough L.T. Anemia of chronic disease // N. Engl. J. Med. 2005. V. 352. P. 1011-1023.
