Установлено, что рекомбинантный лактоферрин человека (рЛф), выделенный из молока трансгенных коз, связывается с нейтрофилами периферической крови человека. Данное связывание ведет к увеличению внутриклеточной концентрации свободных ионов кальциях за счет мобилизации Са2+ из эндоплазматического ретикулума и входа внеклеточных Са2+ через депо-управляемые кальциевые каналы и кальциевые каналы Т-типа, фосфорилированию внутриклеточных белков по тирозину, а также к реорганизации актинового цитоскелета. Показано, что рЛф праймирует fMLP-индуцированный респираторный взрыв нейтрофилов. Полученные данные свидетельствую о том, что рЛф является перспективным белком с иммуномодулирующим действием, направленным на повышение функциональной активности нейтрофилов при патологиях, ассоциированных со сниженной киллерной способностью этих клеток.
рекомбинантный лактоферрин человека, нейтрофилы, респираторный взрыв, ионы кальция, тирозинкиназы, актиновый цитоскелет
1. García-Montoya I.A., Cendón T.S., Arévallo-Gallegos S., Rascón-Cruz Q. Lactoferrin a multiple bioactive protein: an overview. Biochim. Biophys. Acta, 2012, vol. 1820, pp. 226-236.
2. Ward P.P., Paz E., Conneely O.M. Multifunctional roles of lactoferrin: a critical overview. Cell Mol. Life Sci., 2005, vol. 62, pp. 2540-2548.
3. Kolaczkowska E., Kubes P. Neutrophil recruitment and function in health and inflammation. Nat. Rev. Immunol., 2013, vol. 13, pp. 159-175.
4. Suzuki Y.A., Lopez V., Lönnerdal B. Mammalian lactoferrin receptors: structure and function. Cell. Mol. Life Sci., 2005, vol. 62, pp. 2560-2575.
5. Oseas R., Yang H.H., Baehner R.L., Boxer L.A. Lactoferrin: a promoter of polymorphonuclear leukocyte adhesiveness. Blood, 1981, vol. 57, pp. 939-945.
6. Francis N., Wong S.H., Hampson P., Wang K., Young S.P., Deigner H.P., Salmon M., Scheel-Toellner D., Lord J.M. Lactoferrin inhibits neutrophil apoptosis via blockade of proximal apoptotic signaling events. Biochem. Biophys. Acta, 2011, vol. 1813, pp. 1822-1826.
7. Лукашевич В.С., Будевич А.И., Семак И.В., Кузнецова В.Н., Малюшкова Е.В., Пыж А.Э., Новаковская С.А., Рудниченко Ю.А., Попков Н.А., Ивашкевич О.А., Залуцкий И.В. Получение рекомбинантного лактоферрина человека из молока коз-продуцентов и его физиологические эффекты. Доклады НАН Беларуси, 2016, т. 60, № 1, c. 72-81. [Lukashevich V.S., Budevich A.I., Semak I.V. et al. Doklady NAN Belarusi, 2016, vol. 60, no. 1, pp. 72-81. (In Russ.)]
8. Grynkiewicz G., Poenie M., Tsien R.Y. A new generation of Ca2+ indicators with greatly improved fluorescence properties. J. Biol. Chem., 1985, vol. 260, no. 6, pp. 3440-3450.
9. Condliffe A.M., Kitchen E., Chilvers E.R. Neutrophil priming: pathophysiological consequences and underlying mechanisms. Clin. Sci. (Lond.), 1998, vol. 94, pp. 461-471.
10. Swain S.D., Rohn T.T., Quinn M.T. Neutrophil priming in host defense: role of oxidants as priming agents. Antioxid. Redox Signal, 2002, vol. 4, pp. 69-83.
11. Маянский А.Н. НАДФН-оксидаза нейтрофилов: активация и регуляция. Цитокины и воспаления, 2007, т. 6, № 3, с. 3-13. [Mayanskiy A.N. NADPH-oxidase of neutrophils: activation and regulation. Tsitokiny i vospaleniye, 2007, vol. 6, no. 3, pp. 3-13. (In Russ.)]
12. Sheppard F.R., Kelher M.R., Moore E.E., McLaughlin N.J., Banerjee A., Silliman C.C. Structural organization of the neutrophil NADPH oxidase: phosphorylation and translocation during priming and activation. J Leukoc. Biol., 2005, vol. 78, pp. 1025-1042.
13. Lacy P., Eitzen G. Control оf granule exocytosis in neutrophils. Front. Biosci., 2008, vol. 13, pp. 5559-5570.
14. Görlach A., Bertram K., Hudecova S., Krizanova O. Calcium and ROS: A mutual interplay. Redox Biol., 2015, vol. 6, pp. 260-271.
15. Forehand J.R., Pabst M.J., Phillips W.A., Johnston R.B. Lipopolysaccharide priming of human neutrophils for an enhanced respiratory burst. Role of intracellular free calcium. J. Clin. Invest., 1989, vol. 83, pp. 74-83.
16. Finkel T.H., Pabst M.J., Suzuki H., Guthrie L.A., Forehand J.R., Phillips W.A., Johnston R.B. Priming of neutrophils and macrophages for enhanced release of superoxide anion by the calcium ionophore ionomycin. Implications for regulation of the respiratory burst. J. Biol. Chem., 1987, vol. 262, pp. 12589-12596.
17. Митрошина Е.В., Ведунова М.В., Калинцева Я.И. Кальциевый имиджинг в клеточных культурах и тканях. Нижний Новгород: Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского, 2011, 28 с. [Mitroshina E.V., Vedunova M.V., Kalintseva Ya.I. Calcium imaging in cell cultures and tissues. Nizhny Novgorod: Nizhny Novgorod State University. N.I. Lobachevsky, 2011, 28 p. (In Russ.)]
18. McLeish K.R., Knall C., Ward R.A., Gerwins P., Coxon P.Y., Klein J.B., Johnson G.L. Activation of mitogen-activated protein kinase cascades during priming of human neutrophils by TNF-alpha and GM-CSF. J. Leukoc. Biol., 1998, vol. 64, pp. 537-545.
19. Naccache P.H. Signaling in neutrophils: a retro look. ISRN Physiology, 2013, vol. 2013, 13 p.
20. Asahi M., Taniguchi T., Hashimoto E., Inazu T., Maeda H., Yamamura H. Activation of protein-tyrosine kinase p72syk with concanavalin A in polymorphonuclear neutrophils. J. Biol. Chem., 1993, vol. 268, pp. 23334-23338.
